Zawartość

• Treść: Różnica między biblioteką genomową a biblioteką cDNA
• Wykres porównania
• Co to jest Genomic Library?
• Co to jest biblioteka cDNA?
• Kluczowe różnice

Zarówno biblioteka genomowa, jak i biblioteka cDNA są wykorzystywane do klonowania genów w celu izolacji różnych DNA. Różnica między tymi dwiema bibliotekami polega na tym, że biblioteka genomowa zawiera fragmenty DNA, które wyrażają cały genom organizmu, podczas gdy w bibliotece cDNA mRNA jest pobierany z poszczególnych komórek organizmu, a następnie cDNA składa się z tego mRNA w katalizowanej reakcji przez enzym.

Treść: Różnica między biblioteką genomową a biblioteką cDNA

• Wykres porównania
• Co to jest Genomic Library?
• Co to jest biblioteka cDNA?
• Kluczowe różnice

Wykres porównania

Podstawa	Biblioteka genomowa	Biblioteka cDNA
Definicja	Biblioteka genomowa to zbiór pełnego genomowego DNA z jednego organizmu. DNA jest przechowywane w populacji podobnych wektorów, z których każdy zawiera wyraźną wstawkę DNA.	Biblioteka cDNA to mieszanka sklonowanych fragmentów cDNA wstawionych do wybranych komórek gospodarza, które wspólnie tworzą pewną część transkryptomu organizmu.
Wyrażenie	Cały genom	Tylko określone geny.
Rozmiar	Większy	Mniejszy
Introny	obecny	Nieobecny
Wektor	Wykorzystuje plazmidy, kosmid, faga lambda, YAC i BAC do akomodacji dużych fragmentów.	Nie ma intronów, więc wykorzystuje plazmidy, fagemidy i fagi lambda, aby pomieścić skromne fragmenty.

Co to jest Genomic Library?

Podczas procedury klonowania gen będący przedmiotem zainteresowania jest kopiowany z DNA oddzielonego od organizmu. Kiedy DNA zostaje oddzielone od organizmu, jego geny zostały wyekstrahowane jednocześnie. DNA organizmu składa się z tysięcy różnych genów. Inżynier genetyczny znajduje jeden konkretny gen, który koduje dane białko będące przedmiotem zainteresowania.

Nie ma absolutnie żadnej metody, dzięki której dany gen z DNA jest dostępny, więc naukowcy tworzą biblioteki genów do katalogowania DNA organizmu. Naukowcy wybierają pożądany gen z biblioteki. Biblioteka genów to grupa żywych kolonii bakteryjnych transformowanych unikalnymi fragmentami DNA w organizmie, które są źródłem pożądanego genu. DNA jest ekstrahowane z organizmu, aby zbudować bibliotekę, która jest zorganizowaną formą DNA. Biblioteka genomowa i cDNA to dwa rodzaje bibliotek genów. Liczne techniki klonowania genów zostały wykorzystane jako strategie genowe w technologii rekombinacji.

Fragmenty DNA są oddzielane przez cięcie specyficznymi enzymami restrykcyjnymi z macierzystego DNA. Te fragmenty są ligowane z cząsteczkami wektorowymi, a nagromadzone cząsteczki są przenoszone do komórek gospodarza, 1 cząsteczka w każdej komórce. Biblioteka genomowa składa się z intronów, śmieciowego DNA i szeregu innych fragmentów. W tej bibliotece DNA jest dzielone na mniejsze fragmenty w komórce. Następnie wszystkie małe części są wstawiane do wektora w celu utworzenia biblioteki. Biblioteka genomowa zawiera całe DNA całych genów, a komórka składa się ze wszystkich intronów. Genomowe DNA jest tłumaczeniem całego genomu. Nie koduje całej części na jednym kodonie ze względu na rozmiar intronów. W bibliotece genomowej nie ma żadnego mechanizmu składania, który powoduje trudności w ekspresji genów pobranych z tej biblioteki.

Co to jest biblioteka cDNA?

Biblioteka cDNA jest konstruowana poprzez wybranie jednej tkanki lub typu komórki. Następnie mRNA izoluje się z tej tkanki lub komórki. Kopia DNA cząsteczki mRNA składa się ze specyficznego enzymu enzymu odwrotnej transkryptazy. Więc biblioteka cDNA zawiera ten specyficzny DNA, który jest obecny w mRNA. W tej bibliotece nie znaleziono intronów ani sekwencji DNA. W tej bibliotece wszystkie klony są pełnej długości. Ponadto klon cDNA jest niezbędny do transfekcji komórek do produkcji białka lub do testów opartych na komórkach.

Kluczowe różnice

1. Biblioteka genomowa została napisana bezpośrednio z genomowego DNA.
2. Biblioteka cDNA została utworzona przy użyciu mRNA jako szablonu.
3. Biblioteka genomowa zajmuje cały genom tego organizmu.
4. Biblioteka cDNA reprezentuje tylko geny poszczególnych dolegliwości.
5. Dwa enzymy, endonukleazy restrykcyjne i ligazy są ważne dla konstrukcji biblioteki genomowej.
6. Enzym odwrotnej transkryptazy odgrywa znaczącą rolę w konstrukcji biblioteki cDNA.
7. Biblioteka genomowa zajmuje DNA zarówno organizmów prokariotycznych, jak i eukariotycznych.
8. Biblioteka cDNA reprezentuje DNA tylko organizmów eukariotycznych.
9. Biblioteka cDNA jest zdolna do ekspresji genomu u bakterii prokariotycznych, ponieważ brakuje im intronów.
10. Biblioteka genomowa nie jest w stanie powiedzieć w organizmie prokariotycznym, ponieważ ma introny, a organizm prokariotyczny nie ma żadnych maszyn do przetwarzania intronów.